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陽離子交換色譜法采用含有硫離子的強(qiáng)陽離子或含有羧甲基(CM)官能團(tuán)的弱陽離子交換劑。抗衡離子(常為 Na+)維持電中性。 在離子交換色譜法中,流動相緩沖劑的 pH 值必須在電荷分子 pI 值或 pKa 值與固定相上電荷基團(tuán)的 pKa 值之間。例如,在陽離子交換色譜法中, pI 值為 8.2 的分子在 pH 6.0 的流動相緩沖劑中溶解,同時固定相 pKa 值為 1.2。
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陰離子交換色譜柱
陰離子交換色譜法采用含有季銨離子的強(qiáng)陰離子或采用具有叔胺或仲胺官能團(tuán)(如DEAE,即二乙氨乙基)的弱陰離子交換劑。抗衡離子(常為 Cl- )維持電中性。 在離子交換色譜法中,流動相緩沖劑的pH 值必須在電荷分子 pI 值或 pKa 值與固定相上電荷基團(tuán) pKa 值之間。例如,在陰離子交換色譜法中, pI 值為 6.8 的分子在 pH 值為 8.0 的流動相緩沖液中解離,同時固定相 pKa 為 10.3。
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