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抗體偶聯(lián)藥物(ADC)純化選擇
發(fā)布時(shí)間：
2022-10-20
抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）是通過偶聯(lián)臂將抗體和小分子藥物相結(jié)合，可殺死或抑制癌細(xì)胞等特定細(xì)胞的抗體藥物。到2021年10月為止，除了美國FDA已經(jīng)批準(zhǔn)上市的12個(gè)品種以外，還有3種具有類似結(jié)構(gòu)的免疫毒素偶聯(lián)物（重組）也獲得了批準(zhǔn)。隨著研發(fā)的不斷推進(jìn)，目前還有約150種ADC藥物正處于臨床試驗(yàn)階段。
在ADC的純化工藝中常用到的分離方法，一種是在抗體上結(jié)合藥物之后，通過疏水層析（HIC）分離出結(jié)合小分子藥物數(shù)量不同的ADC；另一種是通過尺寸排阻層析（SEC）根據(jù)分子尺寸的差異，分離ADC的多聚體和未反應(yīng)試劑。
利用疏水填料進(jìn)行純化示例
HIC column (0.8 *10 cm, 5 mL) ToyoPearl Phenyl-650S HIC resin (Tosoh Bioscience)
buffer A ：50 mM sodium phosphate pH 7.0, 2 M sodium chloride (NaCl)
buffer B ：50 mM sodium phosphate pH 7.0, 20% isopropyl alcohol (IPA) v/v).
loading：25mg/ml sample 25ml+25ml buffer A
Linear gradient：100% buffer A to 100% buffer B
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